Regulación de la expresión de la carboxipeptidadas y de levadura de fisión schizosaccharamyces pombe

Resumo

La regulación de la expresión génica es un aspecto fundamental en procesos tales como el crecimiento celular, la diferenciación de organismos pluricelulares o la respuesta celular a condiciones ambientales cambiantes. Uno de los mecanismos genéricos de control transcripcional en levadruas es la Represión catabólica por nitrógeno, fenómeno mediante el cual la presencia en el medio de cultivo de fuentes nitrogenadas de fácil utilización, reprime la síntesis de permeasas y enzimas necesarios para la utilización de fuentes de nitrógeno secundarias. En esta Tesis se ha aislado y secuenciado el gen cpy1+ que codifica la carbopeptidasa Y de la levadura de fisión Shizosaccharomyces pombe, una preproteína de 1002 aminoácidos, en cuyo extremo carboxilo terminal se localiza el dominio típico de serín carboxipeptidasas de la familia S10. La transcripción del gen cpy+esta regulada mediante represión catabólica por nitrógeno, elevándose los niveles de mensajero y de actividad enzimática al eliminar la fuente de nitrógeno del medio o al proporcionar a las células una fuente de dificil utilización como la Prolina. Además, el dipeptido A-Phe-Leu-OH parece comparterse como un inductor de la expresión del gen. Situaciones de estrés, como el choque térmico y osmótico, parecen no tener efecto sobre la expresión del gen, el cual no está sometido a represión catabólica por glucosa. El análisis informático de la región promotora reveló la presencia de nueve secuencias consenso para la unión de factores de transcripción de la familia GATA, implicados en el metabolismo del nitrógeno. La región comprendida entre las posiciones -195 y -154, que contiene dos secuencias TATC orientadas cabeza/cola separadas por 25 pb, es capaz de unir posibles factores de transcripción, tanto en condiciones represores, como depresores, como de ayuno corto de nitrógeno. La región comprendida entre las posiciones -116 y -93,q